Bagaimana untuk memilih lajur yang betul?

? ? ? ? ? ? ? ?

Date:2021-11-04 17:32:46 Thursday

Summary: ① Matriks pembungkusan lajur kromatografi A. Matriks gel silika: ketulenan tinggi, kos rendah, kekuatan tinggi, pengubahsuaian kimia mudah, tetapi julat pH adalah terhad. Kebanyakan pengisi matriks silika adalah stabil antara pH 2-8, tetapi fa......

① Matriks pembungkusan lajur kromatografi
A. Matriks gel silika: ketulenan tinggi, kos rendah, kekuatan tinggi, pengubahsuaian kimia mudah, tetapi julat pH adalah terhad. Kebanyakan pengisi matriks silika adalah stabil antara pH 2-8, tetapi fasa ikatan gel silika yang diubah suai khas boleh distabilkan pada pH 1.5-10.
B. Matriks polimer: julat pH aplikasi luas, suhu stabil (suhu tinggi boleh mencapai melebihi 80 darjah), dan kekuatan mekanikal yang rendah.
②Bentuk zarah
Kebanyakan pengisi HPLC moden adalah zarah sfera, tetapi kadangkala zarah tidak teratur. Zarah sfera memberikan tekanan lajur yang lebih rendah, kecekapan dan kestabilan lajur yang lebih tinggi, dan hayat lajur yang lebih lama. Apabila menggunakan fasa aktif berkelikatan tinggi; zarah tidak sekata mempunyai luas permukaan spesifik yang lebih besar dan harga yang agak rendah.
③Saiz zarah
Lebih kecil saiz zarah, lebih tinggi kecekapan dan lebih tinggi resolusi, tetapi pada masa yang sama ia akan membawa kepada penurunan tekanan lajur yang lebih tinggi. Pilih bahan pembungkusan 1.5-3μm untuk menyelesaikan beberapa sampel yang kompleks, UPLC boleh menggunakan pembungkusan 1.5μm; satu lagi pembungkusan saiz zarah 10μm atau lebih besar digunakan sebagai lajur separuh persediaan atau persediaan.
④Kandungan karbon
Kandungan karbon lajur kromatografi merujuk kepada nisbah fasa terikat pada permukaan gel silika, yang berkaitan dengan luas permukaan tertentu dan liputan ikatan. Kandungan karbon tinggi meningkatkan kapasiti lajur, resolusi dan masa analisis, dan digunakan untuk sampel kompleks yang memerlukan resolusi tinggi; kandungan karbon rendah mempunyai masa analisis yang singkat dan mempamerkan selektiviti yang berbeza, dan digunakan untuk analisis pantas sampel mudah dan fasa aktif yang mengandungi air tinggi. Sampel keadaan. Secara amnya, kandungan karbon C18 berkisar antara 7-19%.
⑤ Saiz liang dan luas permukaan tertentu
Medium penjerapan HPLC ialah zarah berliang, dan kebanyakan permukaan tindak balas berada di dalam liang. Oleh itu, molekul mesti memasuki liang untuk diserap dan diasingkan.
Saiz liang lajur kromatografi dan luas permukaan tertentu ialah dua konsep pelengkap. Saiz liang adalah kecil dan luas permukaan tertentu adalah besar, dan sebaliknya. Luas permukaan khusus yang besar, meningkatkan tindak balas antara sampel dan fasa terikat, meningkatkan penyimpanan, pemuatan sampel, dan pengasingan komponen kompleks; luas permukaan khusus yang kecil, masa keseimbangan yang cepat, sesuai untuk analisis kecerunan.
⑥ Isipadu liang dan kekuatan mekanikal
isipadu liang, juga dikenali sebagai "isipadu liang". Merujuk kepada saiz isipadu lompang setiap zarah. Ia juga boleh mencerminkan kekuatan mekanikal pengisi. Pengisi dengan isipadu liang besar mempunyai kekuatan mekanikal yang lemah sedikit berbanding dengan isipadu liang kecil. Pengisi dengan isipadu liang 1.5 mL/g atau kurang kebanyakannya digunakan untuk pengasingan HPLC, manakala pengisi dengan isipadu liang lebih daripada 1.5 mL/g digunakan untuk kromatografi pengecualian saiz dan kromatografi tekanan rendah.
⑦ penutup hujung
Penutup hujung lajur boleh mengurangkan puncak ekor sebatian asas kutub disebabkan oleh interaksi dengan kumpulan silanol yang terdedah. Fasa ikatan yang tidak disekat akan mempunyai selektiviti yang berbeza berbanding dengan fasa ikatan terhalang, terutamanya untuk sampel kutub.